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重慶HIV實(shí)驗(yàn)室的樣品采集和處理方法

admin 2020-09-04 22:18:07 16667閱讀


HIV實(shí)驗(yàn)(experiment)室的樣品采集和處理方法:
艾滋病檢測(cè)最常用的樣品是血液,包括血清、血漿和全血。唾液或尿液有時(shí)也可作為測(cè)試(TestMeasure)樣品。常用的血液樣品的采集和處理方法如下:
血清樣品采集和處理
1 用一次性注射器(或真空采血管)抽取一定量靜脈血,室溫下自然放置1~2小時(shí),待血液凝固(solidification)、血塊收縮后再用3、000r/min離心15min,吸出血請(qǐng)備用。凈化實(shí)驗(yàn)室控制系統(tǒng)是整個(gè)潔凈實(shí)驗(yàn)室安全運(yùn)行的神經(jīng)中樞,由于潔凈實(shí)驗(yàn)室-生物安全實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)對(duì)象是危險(xiǎn)性的微生物,出于嚴(yán)格控制污染的原則,它要求以最少的維護(hù)人員,運(yùn)用最優(yōu)化的管理維護(hù)手段,來實(shí)時(shí)監(jiān)控每一個(gè)實(shí)驗(yàn)室中設(shè)備所處的物理環(huán)境,保證實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行過程中始終處于相對(duì)負(fù)壓環(huán)境,防止危險(xiǎn)性微生物外泄。
2如用濾紙(Filter Paper)片采樣,則手指或耳垂局部(part)嚴(yán)格按常規(guī)進(jìn)行消毒,在刺破皮膚,迅速把濾紙(Filter Paper)片沾上,切勿讓血液滴落在其它物體表面造成污染。采血后要待血樣干燥后再包裝送檢。
抗凝血樣品采集和處理
1用加有抗凝劑的真空采血管(或一次性注射器抽去靜脈血,轉(zhuǎn)移至加有抗凝劑的試管),反復(fù)輕搖,分離血漿和血細(xì)胞(blood cell)備用。實(shí)驗(yàn)室凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)必須可靠運(yùn)行,采用先進(jìn)技術(shù),合理利用和節(jié)約能源與資源,保證環(huán)境的質(zhì)量和安全,為實(shí)驗(yàn)人員提供所需要的溫度和濕度,保障生物實(shí)驗(yàn)在安全的條件下進(jìn)行,以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果得準(zhǔn)確性。潔凈實(shí)驗(yàn)室主要用于微生物學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、生物化學(xué)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、基因重組以及生物制品等研究使用的實(shí)驗(yàn)室統(tǒng)稱潔凈實(shí)驗(yàn)室-生物安全實(shí)驗(yàn)室。無菌試驗(yàn)室、生物安全實(shí)驗(yàn)室由主實(shí)功能驗(yàn)室與其他實(shí)驗(yàn)室及輔助功能用房組成。
2應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)(experiment)要求選用適當(dāng)?shù)目鼓齽鏑D4+/CD8+T淋巴細(xì)胞測(cè)定可選用K3EDTA或肝素或檸檬酸鈉(Sodium),HIV病毒分離、核酸定性/定量檢測(cè)可選用K3EDTA或枸櫞酸鈉(Sodium)。
3用于核酸定性檢測(cè)時(shí),采集的抗凝全血應(yīng)在4~8h內(nèi)分離PBMC和血漿,否則應(yīng)在24~48h內(nèi)分離血漿和血細(xì)胞(blood cell)。(病毒載量測(cè)定不同方法對(duì)樣品的要求見第四章4.1中表2;CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞測(cè)定樣品采集要求見第五章4.1。) 2.1.3 采集樣品注意事項(xiàng)
3.1采集樣品原則上應(yīng)按臨床采血技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)操作(試劑盒有特殊要求)。
3.2采集樣品時(shí)應(yīng)注意安全,建議采用真空采血管及蝶形針具,以避免直接接觸血液;直接接觸HIV感染者/艾滋病(AIDS)病人血液/體液的操作,應(yīng)帶雙層手套。

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